技術(shù)文章
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簡介?由于間充質(zhì)干細胞(MSC)具有自我更新和多向分化的能力,如分化成脂肪,骨,軟骨,心肌等多種細胞,并能通過多種機制活化機體功能,在傷口愈合及免疫系統(tǒng)疾病治療等多方面起到重要的作用,因此運用干細胞移植治療疾病的前景非常廣闊。間充質(zhì)干細胞的主要來源包括臍帶、脂肪、骨髓,在體外有效獲得大量間充質(zhì)干細胞是臨床應(yīng)用的基礎(chǔ)。目前市場上可提供間充質(zhì)干細胞擴增培養(yǎng)基分多種類型:含血清,含血清替代物及成分明確的培養(yǎng)基??祵嶤orning®MSCXeno-FreeSFM(Cornin...
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檢測DNA甲基化需多個技術(shù)環(huán)節(jié):制備基因組DNA樣品;DNA的片段化,再用亞硫酸氫鈉處理,使未甲基化C轉(zhuǎn)變成U而甲基化C保持不變;純化亞硫酸氫鈉處理后的痕量DNA;用qPCR或二代測序等檢測。MSP-ZEWB提取基因組DNA效力與常用硅醇磁珠相當。MSP-ZEWB純化亞硫酸氫鈉處理后痕量DNA的片段耐受高濃度陰離子干擾(參見:IntJBiolMacromol2018;120(B):2234-2241)。MSP-ZEWB提取短鏈核酸效力強,屬于其優(yōu)勢應(yīng)用之一。磁珠特點?核-殼結(jié)...
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MSP-ZEWB對水溶蛋白非特異吸附低,提取細胞外游離核酸時可不去蛋白(耐受殘留細胞干擾),提取效力強于硅醇磁珠,適合血漿、血清、羊水中循環(huán)非細胞DNA(Circulatingcell-freeDNA,cfDNA)。需長時間保存所提取的cfDNA則宜變性蛋白,終濃度3.0M鹽酸胍適用。吸附核酸時MSP-ZEWB對核酸片段長度的選擇性與硅醇磁珠相反:對短鏈核酸效力強于長鏈核酸。選擇提取短鏈核酸為MSP-ZEWB特色。提取cfDNA備選流程:用蛋白酶K室溫處理液體樣品約10min...
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美國R&DSystems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表面,并保持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,elisa試劑盒又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物...
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兩性解離離子交換磁珠MSP-ZEWB為明星產(chǎn)品,表面有兼性離子對修飾層,脂肪族羧基、脂肪族氨基及咪唑基組成的兩性解離基團;pH~4.2經(jīng)靜電吸引結(jié)合陰離子(核酸),pH~8.6時靜電排斥洗脫陰離子(核酸)。兩性解離離子交換磁珠結(jié)合樣品中帶同種電荷離子時基本無選擇性,但磁珠與核酸之間的靜電吸引顯著強于硅醇磁珠與核酸之間的氫鍵。提取痕量樣品(如脫落細胞)中核酸是MSP-ZEWB的優(yōu)勢應(yīng)用之一。提取RNA備選流程:終濃度3.0M鹽酸胍變性樣品中蛋白;吸附緩沖液稀釋并調(diào)節(jié)混合物pH到...
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